荧光光度法和红外分光光度法在原理、仪器结构、灵敏度、应用范围等方面存在明显区别,以下是具体介绍:
原理
· 荧光光度法:某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长更长的荧光。物质的激发光谱和荧光发射光谱可用于该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂和温度等条件固定时,物质在一定浓度范围内,其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系,可用于含量测定。
· 红外分光光度法:物质分子吸收特定波长的光能,能引起分子振动和转动能级跃迁,产生的吸收光谱一般在2.5~25μm的中红外光区,称为红外分子吸收光谱,简称红外光谱。利用红外光谱对物质进行定性分析或定量测定的方法称红外分光光度法。
仪器结构
· 荧光光度法:测量荧光的仪器主要由激发光源、样品池、双单色器系统、检测器四个部分组成,有两个单色器,光源与检测器成直角。
· 红外分光光度法:仪器流程为光源→吸收池→单色器→检测器→记录装置,分为色散型(已淘汰)和干涉型。光源一般常见的为硅碳棒,特殊线圈,能斯特灯(已淘汰);检测器多用热电性硫酸三甘肽(TGS)或光电导性检测器;吸收池有液体池和气体池(具有岩盐窗片)。
灵敏度
· 荧光光度法:灵敏度比紫外-可见分光光度法高2~4个数量级,检测限可达10⁻¹⁰~10⁻¹²g/ml。
· 红外分光光度法:灵敏度低,不宜进行微量成分定量测定,后来发展起来的傅立叶红外光谱法克服了灵敏度低的不足,可测定10⁻⁹g的微量样品。
应用范围
· 荧光光度法:选择性好,但应用范围相对较窄。可用于无机化合物的分析,如与有机试剂配合物后测量约60多种元素;也可用于生物与有机化合物的分析。
· 红外分光光度法:应用广泛,可用于分子结构的基础研究,如测定分子键长、键角,推断分子的立体构型等;也可用于化学组成的分析,如化合物的定性定量分析,尤其在对未知毒物的结构分析、纯度鉴定方面应用较多。
广东中翰检测技术有限公司